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维生素C检测试剂盒(铜氧化比色法)主要用于植物组织中的维生素C(抗坏血酸)的检测。

维生素C的分子结构中具有共轭双键，在酸性溶液中243nm处有最大吸收峰，在中性或碱性条件下最大吸收峰转移至265nm处，利用铜离子消除背景差异，可用分光光度计直接测定样品中的维生素C含量。

• 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
  
• 待测样品如不能及时测定，应置于2～8℃保存，3天内稳定。
  
• 如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 稀释组织匀浆液：按10×组织匀浆液∶蒸馏水=1∶9的比例稀释，获得1×组织匀浆液。
  
• 制备样品：取待测材料如青菜、水果以及其他组织等，清洗擦干，准确称量30g，加入研磨器内，再加入少量1×组织匀浆液，研磨碎，留取上清，再次用1×组织匀浆液研磨，最后一并倒入50mL离心管，补充1×组织匀浆液至50mL，充分混匀，10000g离心5min，取0.5mL上清液，即为待测液；液体样品直接检测或稀释后进行检测。
  
• 配制系列Vitamin C标准：将24mg Vitamin C标准用20mL 1×组织匀浆液溶解即得Vitamin C标准(1.2mg/mL)，再用1×组织匀浆液稀释成Vitamin C标准(12μg/mL)，4℃保存备用，取干净离心管或试管，按下表进行操作，依次稀释。
  

  加入物(mL)	1	2	3	4	5
  Vitamin C标准(12μg/mL)	0.05	0.1	0.15	0.2	0.25
  蒸馏水	0.45	0.4	0.35	0.3	0.25
  Vitamin C浓度(μg/mL)	1.2	2.4	3.6	4.8	6

• 加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的Vitamin C含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
  

  加入物(mL)	空白管	标准管	测定管I	测定管II
  待测液	－	－	0.5	0.5
  Vitamin C标准(1～5号)	－	0.5	－	－
  蒸馏水	0.5	－	－	－
  Cu酸性缓冲液	2	2	2	2
  50℃水浴15min。
  Vc Assay Buffer	0.5	0.5	0.5	0.5

• Vitamin C测定：混匀，以空白调零，酶标仪测定265nm处标准管、测定管I、测定管II的吸光度。